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大兴安岭野生蔓越莓菌根真菌的分离与建立分析

发布时间:2019/08/27 点击量:
大兴安岭野生蓝莓菌根真菌的分离与定殖分析
徐星朋友
[摘要]:与大多数植物一样,菌根真菌也与蓝莓根共存。这些菌根属于ericoid mycorrhiza(ERM)。
菌根极大地影响蓝莓植物的养分吸收,抗病性和抗逆性,其促进生物生长的功能极为重要。
本研究在安兴安岭地区分离鉴定了菌根野生蓝莓真菌,采用原位PCR技术分析了蓝莓根系菌根定殖。
通过了解大兴安岭野生蓝莓菌根真菌的主要群体及其在大兴安岭的定植,为优良微生物制剂的开发和应用,引种栽培奠定基础。可以晋升。促进大兴安岭地区野生蓝莓和农业生产中菌根技术的培育。该应用程序非常重要。
结果如下:(1)以大兴安岭野生蓝莓为实验材料,在马丁 - 孟加拉(MA)红色培养基和MMN培养基中分离出139株真菌。结果通过菌落形态学和分子生物学方法分类。结果如下:oiyodendron,Crypyposporiopsis,Phialocephale,Lachnum,Yarrowialipolytica,Chaetomium globosum,Sordariomycetessp。
Mukoro尼古丁。
(2)使用质粒pCAMBIA1300作为骨架,将质粒pCT74中增强的GFP表达盒克隆到质粒的多克隆位点(MCS)中,并使用潮霉素抗性基因(潮霉素抗性基因)。在表达盒克隆中替换pCAMBIA1300的原始HYG表达盒,并成功构建了pXBtCEHΔGFP表达载体。
(3)通过根癌农杆菌(ATMT)介导的转化,GFP基因成功用于两种内生蓝莓真菌Crypyosporiopsis ericae和Sordariomycetessp。
菌丝在体内表达,荧光显微镜成功观察荧光菌丝形态,培养5代后转化子稳定,PCR转化GFP标记片段。它已成功从人体的基因组中获得。
(4)以菌根真菌为材料,以ITS1 / ITS4引物和菌根核糖体DNA为模板,以菌根真菌处理的无菌蓝莓组织培养苗为试材,进行横断面和纵向生根。成功地测试地高辛标记的DNA探针并使用原位PCR方法分析蔓越莓根上的真菌定殖。
结果表明,蔓越莓根部有效地建立了菌根真菌,其分布主要集中在根表皮和表皮附近皮层薄壁细胞中。菌根真菌在根表面具有多个进入位点,并且表皮菌落的数量大于皮质菌落的数量。
[补助单位]:东北林业大学[学年]:硕士学位[奖励年份]:2015年[分类号]:S663。
9; Q93
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